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明膠蛋白胨使用有講究！關鍵細節沒搞懂，效果可能打折扣
發布時間： 2026-06-27 點擊次數： 105次明膠蛋白胨是胰酶消化動物明膠所得的蛋白胨，胱氨酸和色氨酸含量低，甘氨酸和脯氨酸含量高，且不含有可發酵的碳水化合物，營養較低。比較適合于糖醇發酵中提供氮源和制備低營養培養基。本品為淡黃色至類白色粉末。蛋白胨是動物蛋白為基質，經過消化、過濾、濃縮、噴霧干燥而得到的一種淺黃色至類白色的干燥粉末。易溶于水，水溶液呈淡黃色。營養豐富可做多種培養基的原材料。在當中它起的主要作用是提供氮源。細菌學蛋白胨含有豐富的蛋白多肽、低肽、氨基酸成分和礦物質。由于用蛋白為原料以及特定的媒介條件，使其含有豐富的色氨酸、脯氨酸、纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸。這些氨基酸是細菌生長所需的重要成分和生長因子。明膠蛋白胨在使用方面的注意事項：一、稱量與配液前操作防潮快速稱量本品吸濕性強，陰雨天、高濕環境盡量不開蓋稱量，操作縮短時長；大包裝建議提前干燥分裝小瓶，減少反復開蓋進水汽。結塊輕微且無霉變、無異味可研磨后使用；板結發硬、發黃發黏、有酸味霉味直接廢棄。水質選擇配制培養基優先使用純化水/蒸餾水，不可用自來水（鈣鎂離子、余氯會影響微生物生長）；水質偏硬可少量添加緩沖鹽穩定pH。溶解操作要點粉末緩慢撒入水中，邊攪拌邊加熱（小火），溫度40~60℃即可快速溶解，不要一次性大量倒入，防止抱團糊底；不可高溫久煮，長時間煮沸會破壞氨基酸，降低營養效果。二、pH調節與滅菌關鍵pH控制明膠蛋白胨水溶液本身偏弱酸性，多數細菌培養基標準pH 7.0~7.2；滅菌前用1mol/L NaOH或HCl微調，滅菌后pH會下降0.1~0.3，調pH時預留差值。滅菌規范常規采用121℃、0.1MPa、15min高壓蒸汽滅菌；含高濃度明膠蛋白胨培養基，滅菌時間不宜延長，過長高溫會造成蛋白分解、培養基發黑、營養失效；若搭配明膠做低溫凝固培養基，滅菌后水浴降溫至45~50℃再倒平板，溫度過高會殺死熱敏菌。禁止反復滅菌培養基滅菌一次即可，二次高壓會嚴重破壞胨中多肽、氨基酸，培養菌液長勢變差。三、培養基配制與應用使用適用范圍區分明膠蛋白胨富含膠原蛋白水解多肽，多用于明膠液化試驗、需氧/厭氧菌基礎培養基、微生物增菌培養；不適用于需要高氮源、維生素豐富的真菌、特殊營養苛求型菌株（建議搭配酵母粉使用）。配比參考常規基礎培養基添加量10~20g/L；做明膠生化鑒定培養基需搭配明膠，不可單用明膠蛋白胨。溫度使用限制配制好的明膠培養基使用、培養溫度不可超過30℃，溫度過高明膠無法凝固，無法觀察液化反應。四、無菌操作與培養觀察倒平板、分裝試管全程無菌操作，避免雜菌污染；配好未滅菌液體放置不超過2小時，防止雜菌提前繁殖消耗營養。明膠液化試驗培養：20~22℃恒溫培養，切勿37℃培養，高溫導致明膠自然液化，無法判定試驗結果。若培養基出現渾濁、沉淀、分層，說明胨已變質或滅菌過度，不能用于試驗。五、安全防護操作粉塵防護稱量時避免粉末飛揚，蛋白胨粉塵易刺激呼吸道、眼黏膜，建議佩戴口罩、護目鏡；若吸入出現咳嗽、鼻腔不適，及時通風清水清洗。接觸處理皮膚大量接觸后清水沖洗；不慎r眼，大量流動清水沖洗5~10分鐘，不適及時就醫。廢棄物處理廢棄干粉、變質培養基不可直接倒入下水道，高溫滅菌后按生化垃圾處理，防止滋生微生物污染環境。六、儲存配套使用禁忌取用后瓶蓋立即擰緊，內置干燥劑定期更換；冷藏儲存時，必須恢復至室溫再開蓋，防止瓶內冷凝水結塊變質。不可與強酸、氧化劑、揮發性消毒試劑同柜存放，揮發氣體滲入會導致胨氧化酸敗。遵循先進先出，開封后干粉室溫6個月、冷藏12個月內用完，超期營養成分衰減，試驗結果偏差大。
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